HPV16 E7基因慢病毒载体的构建及鉴定

作者：赖云建; 周春丽; 王儒鹏; 何威

来源：免疫学杂志, 2011, (04): 338-341.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20110079

• HPV16E7基因
• 慢病毒载体
• 293T细胞 HPV16 E7
• Lentivirus vector
• 293Tcells

目的构建HPV16 E7慢病毒表达载体。方法用RT-PCR方法从Caski细胞中扩增HPV16 E7基因的编码区序列,对扩增出目的片段酶切纯化后将目的片段交换连接入慢病毒表达质粒,酶切鉴定并测序正确后进行慢病毒包装和滴度测定。Western-blot验证3FLAG-E7融合蛋白在293 T细胞中的表达。结果成功获得HPV16 E7基因,成功将HPV16 E7克隆到慢病毒表达质粒中,且包装产生的慢病毒颗粒能成功表达3FLAG-E7融合蛋白。结论成功构建HVP16 E7和flag基因共表达的慢病毒表达载体,为进一步研究HPV16 E7基因的功能建立了高效稳定的转基因技术平台。

• 单位
  新桥医院