携带blaKPC-3基因肺炎克雷伯菌新生儿分离株的研究

作者:冯渐焘; 陈爱文; 李笃军; 刘艳飞; 陈海霞; 董丹丹; 朱元祺*
来源:中国实验诊断学, 2020, 24(09): 1453-1457.

摘要

目的探讨肺炎克雷伯菌新生儿分离株QD167对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的分子机制。方法菌株QD167的鉴定和药敏采用梅里埃VITEK 2Compact自动系统。通过PCR扩增和产物测序获得菌株的多位点序列和携带的碳青霉烯酶耐药基因。质粒液相接合和S1-PFGE检测菌株携带的质粒特性。基于二代Illumina MiSeq和三代MinION平台获得接合子携带的质粒序列,使用BLASTN等软件分析质粒的耐药基因和移动元件。结果肺炎克雷伯菌QD167株携带blaKPC-3基因,多位点序列属于ST1型。另外,该菌能把携带blaKPC-3基因的质粒转移到大肠埃希菌J53AziR而获得接合子QD167C,将其携带的质粒命名为pKPC-167。通过高通量测序获得了该质粒的全序列(GenBank:MH236906)。生物信息分析显示pKPC-167质粒大小为43 333bp,属于IncX6型,携带有blaKPC-3和blaTEM-1基因。结论研究表明,肺炎克雷伯菌QD167株对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药与其携带blaKPC-3基因有关。经检索,在ST1型肺炎克雷伯菌中检测到携带blaKPC-3和blaTEM-1基因的IncX6型质粒属于国内外首次报道。