PTD-ABD融合蛋白对髓系白血病细胞的增殖和凋亡的影响

作者：康志杰; 闫金松; 崔嵩; 李国辉; 黄斯勇; 梁亮; 尹郸丹; 梁英民

来源：第三军医大学学报, 2014, 36(05): 417-421.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2014.05.018

• BCR/ABL融合蛋白
• 肌动蛋白结合域
• 蛋白转导结构域
• K562细胞
• HL60细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的研究癌基因BCR/ABL C末端肌动蛋白结合域(actin-binding domain,ABD)蛋白对白血病细胞增殖和凋亡的影响。方法构建含有ABD基因的重组表达载体,应用蛋白转导结构域(protein transduction domain,PTD)将蛋白转入白血病细胞内,应用Western blot与免疫荧光法确定蛋白是否进入白血病细胞,然后分别应用流式细胞仪及MTT法检测融合蛋白对白血病细胞凋亡及增殖的影响。结果成功构建PTD-ABD融合表达载体,获得高纯度PTD-ABD融合蛋白。同时构建PTD表达载体并获得高纯度表达蛋白。将PTD、PTD-ABD蛋白与白血病细胞K562、HL60共培养,Western blot与免疫荧光法确定PTD、PTD-ABD蛋白成功进入细胞内。与阴性对照比较,PTD-ABD蛋白能显著抑制HL60细胞的生长,并且对HL60细胞的凋亡具有明显的促进作用,差异具有统计学意义(P<0.05),但对K562细胞的增殖及凋亡无影响(P>0.05);PTD蛋白对K562、HL60细胞的增殖及凋亡无影响,与阴性对照比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PTD转导的ABD蛋白抑制HL60细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。

• 单位
  第四军医大学; 大连医科大学