海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌二重PCR检测方法的建立及应用

作者：武迪; 陈世玖; 王成; 龙航; 杨军; 刘珑玲

来源：中国现代医学杂志, 2018, 28(04): 45-50.

• 二重PCR
• 海分枝杆菌
• 溃疡分枝杆菌
• 同步检测
• 手
• 皮肤软组织

目的建立一种能同步检测鉴定海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的二重PCR方法,为手部及皮肤软组织感染海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌早期诊断、早期治疗服务。方法通过Gene Bank数据库和文献查找海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的特有基因序列,设计2对能扩增海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌特有序列的引物,建立能同步检测鉴定海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的二重PCR,特异性及敏感性。并初步应用该二重PCR检测鉴定19份临床考虑上肢感染NTM的标本。结果本研究成功地建立能同步检测鉴定海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌的二重PCR,扩增产物的长度海分枝杆菌为429 bp,溃疡分枝杆菌为240 bp,检测其他非结核分枝杆菌时未出现阳性条带,敏感性试验最低可检测出0.508 pg/μl海分枝杆菌,44.8 fg/μl溃疡分枝杆菌。检测鉴定19份临床标本,42.1%(8份)为海分枝杆菌感染,15.8%(3份)为溃疡分枝杆菌感染,42.1%(8份)未检出病原菌。结论本研究建立的二重PCR可早期、快速地诊断手部及皮肤软组织感染海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌,为临床制定最佳治疗方案提供一定依据。

• 单位
  遵义医学院第五附属（珠海）医院