摘要
目的克隆分析全长hlrp基因,观察分析hlrp蛋白在不同细胞的表达情况并进行相对定量。方法以LPS刺激HEK293细胞,利用RT-PCR方法,克隆得到全长hlrp分子。用生物信息学进行hlrp分子染色体定位和蛋白功能位点分析。采用免疫荧光细胞化学染色,在激光扫描共聚焦显微镜下观察hlrp蛋白在不同培养组织系HepG2、HeLa、PDC和HEK293中的表达情况。利用实时定量RT-PCR方法,量化比较hlrp基因在不同细胞系中的表达。结果克隆得到全长为2045bp的hlrp分子。该分子染色体定位在Xp22.2。蛋白功能位点分析表明该分子包含2个相互重叠的亮氨酸拉链结构。运用激光扫描共聚焦显微镜可以观察到hlrp蛋白在所用细胞系中均有表达。实时定量RT-PCR结果表明,hlrp分子在HEK293细胞株和PDC细胞株中高表达,并且在PDC细胞株表达高于HEK293细胞株。在HepG2细胞株和HeLa细胞株未见表达。结论克隆分析全长hlrp分子,并研究该分子在不同细胞株的表达情况,为进一步研究该基因的生物学功能奠定基础。
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单位第四军医大学; 西京医院