小鼠膝骨关节炎阳虚血瘀证模型的构建与评价

作者：蔡宏杰; 王旭; 徐建波; 林士能; 童培建; 金红婷; 陈佳丽^*

来源：中医正骨, 2023, 35(06): 18-23.

• 骨关节炎,膝
• 小鼠
• 疾病模型,动物
• 阳虚血瘀
• 动物实验

目的:探讨构建小鼠膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)阳虚血瘀证模型的有效方法。方法:将12只10周龄雄性无特定病原C57BL/6J小鼠采用内侧半月板失稳(destabilized medial meniscus, DMM)法构建KOA模型。KOA造模成功后，将12只KOA模型小鼠随机分为KOA阳虚血瘀证组和KOA对照组，每组6只。KOA阳虚血瘀证组小鼠于浸在冰水混合物中的塑料鼠箱中饲养，并以冰水混合物为饮用水；KOA对照组小鼠于22℃干燥环境中正常饲养。饲养10周后，评价小鼠阳虚血瘀证表现，分析小鼠步态，处死小鼠后进行小鼠膝关节Micro-CT分析、膝关节组织病理学观察及膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链表达检测。结果:(1)小鼠阳虚血瘀证评价结果。KOA阳虚血瘀证组小鼠的阳虚证评分和血瘀证评分均高于KOA对照组[(13.33±1.37)分，(3.50±1.23)分，t=13.120,P=0.000;(4.83±0.75)分，(0.83±0.75)分，t=9.200,P=0.000]。(2)小鼠步态分析结果。2组各收集到5只小鼠完整的步态分析数据。KOA阳虚血瘀证组小鼠右后肢的爪面积和步幅均小于KOA对照组[(0.610±0.094)cm2,(0.758±0.042)cm2,t=-3.211,P=0.012;(1.780±0.045)cm,(2.040±0.152)cm,t=-3.677,P=0.006];2组小鼠右后肢的摆动期时间和站立期时间比较，组间差异均无统计学意义[(0.060±0.004)s,(0.060±0.009)s,t=-0.096,P=0.963;(0.062±0.009)s,(0.076±0.014)s,t=-1.810,P=0.137]。(3)小鼠膝关节Micro-CT分析结果。KOA阳虚血瘀证组小鼠的骨体积分数低于KOA对照组[(55.582±2.810)%,(69.248±1.884)%,t=-6.997,P=0.002],骨小梁分离度大于KOA对照组[(0.114±0.009)mm,(0.077±0.010)mm,t=4.883,P=0.008];2组小鼠的骨小梁厚度、骨小梁数量比较，组间差异均无统计学意义[(0.148±0.005)mm,(0.210±0.036)mm,t=-2.939,P=0.094;(3.767±0.100)个·mm-1,(3.368±0.547)个·mm-1,t=1.243,P=0.282]。(4)小鼠膝关节组织病理学观察结果。2组小鼠膝关节软骨均有缺失，且KOA阳虚血瘀证组小鼠膝关节软骨缺失较KOA对照组更严重。(5)小鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链表达检测结果。KOA阳虚血瘀证组小鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原蛋白α1链阳性表达面积比和平均光密度均低于KOA对照组[(0.144±0.003)%,(0.163±0.003)%,t=-6.580,P=0.003;(0.051±0.002)lux,(0.095±0.004)lux,t=-15.878,P=0.001]。结论:DMM法联合低温诱导法是构建小鼠KOA阳虚血瘀证模型的有效方法。

• 单位
  第一临床医学院; 浙江中医药大学; 浙江省中医院