慢病毒介导的-微RNA对雌鼠促性腺激素释放激素及性激素水平的影响

作者：董红; 周莎莎; 李嫔^*

来源：中华实用儿科临床杂志, 2015, 30(20): 1545-1548.

• KiSS1基因
• 微RNA
• 促性腺激素释放激素
• 性激素

目的通过慢病毒载体介导的RNA干扰(RNAi)技术抑制雌鼠下丘脑KiSS1基因表达,分析KiSS1、促性腺激素释放激素(GnRH)mRNA表达变化,血清性激素水平变化,探讨靶向沉默KiSS1基因对性发育的影响及可能的相关机制。方法 21日龄Sprague-Dawley雌鼠90只,按照随机数字表分为3组:干扰病毒组、病毒对照组、9 g/L盐水对照组。干扰病毒组侧脑室注射携带KiSS1-微RNA(microRNA)的慢病毒,病毒对照组侧脑室注射无干扰作用的对照病毒,9 g/L盐水对照组侧脑室注射9 g/L盐水。在青春期前(30日龄)、青春发育早期(35日龄)、青春发育晚期(45日龄)时分别处死各组动物10只,留取下丘脑组织,实时定量(RT) PCR检测下丘脑KiSS1、GnRH mRNA的表达,并同时留取血清采用化学发光法检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平。结果干扰病毒组的KiSS1 mRNA与9 g/L盐水对照组及病毒对照组相比明显下调(30日龄0.106±0.018;35日龄0.218±0.025;45日龄0.215±0.033,P均=0.000);干扰病毒组的GnRH mRNA表达在30日龄及35日龄显著下降(0.230±0.040、0.407±0.030,P均=0.000),45日龄时GnRH mRNA与9 g/L盐水对照组和病毒对照组相比,差异无统计学意义(0.455±0.054,P>0.05)。干扰病毒组LH水平[(0.101±0.004) IU/L]在35日龄低于9 g/L盐水对照组及病毒对照组(P=0.467);干扰病毒组FSH水平[(0.235±0.014) IU/L]在35日龄低于9 g/L盐水对照组及病毒对照组(P=0.015);干扰病毒组E2水平在35日龄[(171.750±11.050) IU/L]及45日龄[(192.310±13.100) IU/L]时低于9 g/L盐水对照组及病毒对照组(P=0.000,0.010)。结论侧脑室注射携带KiSS1-microRNA的慢病毒载体,可下调KiSS1 mRNA水平,进而影响GnRH mRNA及下游性激素的表达水平、推迟雌鼠的性发育进程。

• 单位
  上海交通大学; 中山大学孙逸仙纪念医院