摘要
目的:探讨CircPTTG1IP调控miR-223-3p/SMAD3轴对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜(FLS)细胞增殖、迁移和炎症反应的影响。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测正常FLS细胞和RA-FLS细胞中CircPTTG1IP、miR-223-3p表达以及SMAD3蛋白表达;双荧光素酶实验验证Circ-PTTG1IP与miR-223-3p、miR-223-3p与SMAD3的关系。将RA-FLS细胞分为RA-FLS组、si-NC组、si-PTTG1IP组、si-PTTG1IP+anti-NC组、si-PTTG1IP+anti-miR-223-3p组,qRT-PCR检测RA-FLS中Circ-PTTG1IP、miR-223-3p表达;CCK8检测RA-FLS增殖情况;流式细胞术检测RA-FLS凋亡率;Transwell实验检测RA-FLS细胞迁移及侵袭情况;Western blot检测SMAD3、EMT相关蛋白表达;ELISA法检测IL-2、IL-6水平。结果:与FLS组比较,RA-FLS组CircPTTG1IP、SMAD3上调,miR-223-3p下调;与RA-FLS组、si-NC组比较,si-PTTG1IP组OD值,RA-FLS细胞迁移、侵袭数量,Circ-PTTG1IP、SMAD3、N-cadherin、Vimentin蛋白表达,IL-6、MMP-2水平均显著降低(P<0.05),miR-223-3p表达、细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达以及IL-2水平均显著升高(P<0.05);miR-223-3p沉默减轻了上述指标的变化;Circ-PTTG1IP靶向调控miR-223-3p/SMAD3轴。结论:沉默Circ-PTTG1IP可能通过上调miR-223-3p来抑制SMAD3表达,进而抑制RA-FLS增殖、迁移和炎症反应。
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单位湖北医药学院; 湖北省十堰市太和医院; 十堰市人民医院