肝受体同系物1对大鼠急性胰腺炎细胞模型中腺泡细胞损伤修复的影响及其机制

作者：孙亚梅; 张杰^*

来源：中国医药, 2021, 16(11): 1723-1727.

• 急性胰腺炎
• 肝受体同系物1
• 胰腺腺泡细胞
• 细胞修复

目的探讨肝受体同系物1(NR5A2)对大鼠急性胰腺炎(AP)细胞模型中腺泡细胞损伤修复的影响及其机制。方法将大鼠胰腺腺泡细胞系AR42J细胞分为模型组和正常对照组,模型组予100 nmol/L雨蛙素刺激24 h构建体外AP模型,正常对照组予相同体积的磷酸盐缓冲液培养24 h。取对数生长期的AR42J细胞分为对照组、沉默NR5A2组(KD组)和对照慢病毒感染组(LV-control组)。KD组用慢病毒感染AR42J细胞,对照组不处理,LV-control组感染相同体积的对照慢病毒载体。慢病毒感染96 h后,对照组、KD组和LV-control组均予2%胎牛血清饥饿12 h,100 nmol/L雨蛙素刺激细胞24 h,分别设为正常模型组(CAE组)、沉默NR5A2+雨蛙素组(KC组)和对照慢病毒+雨蛙素组(LV-control+CAE组)。定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的m RNA表达量,比色法检测细胞淀粉酶的活性,蛋白质印迹法检测NR5A2和核因子κB P65的表达,细胞增殖实验检测细胞的增殖情况。结果模型组IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA及淀粉酶表达量均高于正常对照组(均P <0.001),体外AP模型构建成功。模型组NR5A2 m RNA及蛋白表达量均低于正常对照组,核因子κB P65表达量高于正常对照组(均P <0.05)。慢病毒感染96 h后,KD组NR5A2 m RNA及蛋白表达量均低于对照组和LV-control组[(0.47±0.07)比(1.00±0.07)、(1.00±0.08),(0.39±0.10)比(1.01±0.08)、(1.04±0.20)](均P <0.05)。雨蛙素刺激24 h后,KC组IL-1β、IL-6、TNF-αm RNA及淀粉酶表达量均高于CAE组及LV-control+CAE组(均P <0.05)。KC组Ed U阳性百分比低于对照组、CAE组及LV-control+CAE组[(7.97±0.29)%比(71.70±1.64)%、(51.63±0.90)%、(45.37±1.31)%](P <0.001)。KC组核因子κB P65表达量高于CAE组和LV-control+CAE组(P <0.001)。结论在体外AP细胞模型中,NR5A2的表达降低可以加重腺泡细胞的炎症反应,抑制腺泡细胞的增殖和再生,影响腺泡细胞的损伤修复,其机制可能与上调核因子κB的表达有关。

• 单位
  首都医科大学附属北京安贞医院