BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

作者：周金武; 程肖蕊; 程军平; 周文霞; 张永祥

来源：国际药学研究杂志, 2010, 37(4): 302-309.

DOI：10.3969/j.issn.1674-0440.2010.04.012

• β分泌酶
• BACE1抑制剂
• 均相时间分辨荧光
• 高通量筛选
• Z'因子

目的建立体外分子水平β-分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系.方法采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系.根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂.结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z'因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6 mol/L的化合物.结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选.

• 单位
  军事医学科学院毒物药物研究所