siRNA对Hela细胞表达VEGF的干涉作用

作者：范斌; 李光宇; 谭岩

来源：中国免疫学杂志, 2006, (08): 700-704.

• RNA干涉
• T7RNA聚合酶
• 血管内皮生长因子
• Hela细胞

目的:研究体外转录合成的siRNA对Hela细胞中VEGF表达的干涉作用。方法:根据人VEGF1～5外显子序列进行siRNA设计,应用T7RNA聚合酶体外转录合成3条siRNA。并利用siPORTLipid将siRNA转染入Hela细胞中,通过半定量RTPCR和免疫荧光方法检测Hela细胞VEGF表达情况,评价不同序列siRNA对VEGF基因表达的干涉作用。结果:体外转录合成的3条siRNA均能高效地抑制Hela细胞中VEGF的表达,干涉效率分别为88.7%、94.2%和80.3%,而1个错配碱基的siRNA及ssRNA(+)未显现明显干涉作用。另外实验显示在5～10pmol范围内,T7siRNA对VEGF表达的抑制作用具有剂量依赖性。结论:利用T7RNA聚合酶体外转录合成的siRNA可以高效干涉Hela细胞中VEGF的表达且具有良好的序列特异性,为肿瘤的基因治疗提供了新方法。

• 单位
  吉林大学; 吉林大学第一医院