中国株马传染性贫血病病毒S2基因的原核表达及其多克隆抗体制备

作者：高华; 高旭; 姜成刚; 赵立平; 马学恩; 周建华

来源：中国预防兽医学报, 2009, (07): 563-567.

• 马传染性贫血病毒
• S2基因
• 原核表达
• 多克隆抗体 EIAV
• S2 gene
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

本实验为表达马传染性贫血病病毒(EIAV)S2蛋白和制备其抗血清,以EIAV感染性分子克隆pFDDV3-8为模板扩增S2基因,将其克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,将S2基因亚克隆于pET-30a表达载体,构建S2基因的重组表达质粒(pET-EIAV-S2),并转化DH5α受体菌。以终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,表达的重组蛋白约20ku。Westernblot分析表明,该蛋白可与EIAV的阳性血清反应,具有免疫原性。该重组蛋白通过镍离子亲和层析进行纯化后,免疫新西兰兔。ELISA及westernblot分析表明,制备的兔多克隆抗体与EIAV的S2蛋白发生特异性反应。EIAVS...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 延边大学; 内蒙古农业大学