牛口蹄疫病毒受体通用亚基αv配体结合域的原核表达和多克隆抗体制备

作者：独军政; 常惠芸; 高闪电; 王光华; 王景锋; 丛国正; 邵军军; 林彤; 才学鹏; 谢庆阁

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (10): 975-977.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004408

• 牛
• 口蹄疫病毒受体
• αv配体结合域
• 原核表达
• 多克隆抗体

目的:利用原核细胞表达牛口蹄疫病毒受体通用亚基整联蛋白αv的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后制备兔多克隆抗体。方法:以含有牛整联蛋白全长cDNA的质粒为模板PCR扩增得到位于αv成熟肽氨基端的LBD基因片段,经酶切消化处理后,与同样酶切处理的原核表达载体pPRoEXTMHTb相连,构建原核表达质粒pPRo/αvLBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达αvLBD蛋白。通过SDS-PAGE鉴定后提取包涵体,以电泳分离纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。通过ELISA和Western blot鉴定血清效价和特异性。结果:成功构建了pP...

• 单位
  农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所