猪脑心肌炎病毒2B蛋白与RACK1蛋白相互作用的鉴定

作者：王岩; 黄丽; 崔尚金; 李江南; 杨春梅; 于会彬; 郭东伟; 张元峰; 夏雪山; 翁长江

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(05): 339-342.

• 猪脑心肌炎病毒
• 酵母双杂交
• 2B蛋白
• RACK1蛋白
• 相互作用

为筛选与猪脑心肌炎病毒(EMCV)2B蛋白相互作用的宿主蛋白,本实验利用酵母双杂交方法筛选BHK-21细胞表达文库制备与EMCV 2B蛋白相互作用的宿主蛋白RACK1蛋白。酵母共转化试验和免疫共沉淀试验表明两者可以特异性结合,激光共聚焦试验表明两者共定位于细胞质中。为定位RACK1与2B蛋白相互作用区域,本研究构建了RACK1截短表达重组质粒,并将其与pCAGGS-Flag-2B共转染HEK293细胞,利用免疫共沉淀试验验证其相互作用区域。结果显示2B蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用,并且证明相互作用区域位于RACK1蛋白的N端。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 昆明理工大学