miR-324-3P对宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移的作用及其机制研究

作者：李一鸣; 陈华; 袁晓燕; 郭东风^*

来源：解放军医学院学报, 2021, 42(01): 88-98.

• 宫颈癌
• 微小RNA-324-3P
• 增殖
• 侵袭
• 转移

背景 miR-324-3P在多种恶性肿瘤中发挥着重要作用,调控Wnt/β-catenin信号通路可能是其参与肿瘤进展的重要途径,mi R-324-3P在宫颈癌中的具体作用尚不清楚。目的研究miR-324-3P对宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移的作用及其机制。方法收集入住我院宫颈癌患者的宫颈癌组织和正常宫颈组织各40例,TargetScan7.1预测软件及双荧光素酶报告基因试验检测miR-324-3P对WNT3a基因的靶向调控作用。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌组织和正常宫颈组织中mi R-324-3P、WNT3a mRNA的表达水平。Pearson法分析宫颈癌组织中miR-324-3P与WNT3a表达的相关性。常规培养宫颈癌细胞(HeLa细胞),将其分为对照组(NC组)、 miR-324-3Pmimic组和miR-324-3Pmimic+oe-WNT3a组,采用Lipofectamine 2000转染试剂进行各组质粒的转染。四唑盐比色法(MTT)检测各组细胞的增殖能力,Boyden实验检测各组细胞的侵袭能力,Transwell实验检测各组细胞的转移能力。Western-blot法检测各组细胞中WNT3a和β-catenin的表达。结果宫颈癌组织中miR-324-3P、WNT3a的相对表达量分别为0.79±0.39、1.46±0.53,与正常宫颈组织相比,miR-324-3P表达降低、WNT3a表达升高。Targetscan7.1预测软件、双荧光素酶报告基因试验及qRT-PCR表明miR-324-3P靶向调控WNT3a,且Pearson分析显示二者呈负相关。与NC组相比,miR-324-3P mimic组和miR-324-3P mimic+oe-WNT3a组宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移能力降低。与miR-324-3P mimic组相比,miR-324-3P mimic+oe-WNT3a组宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移能力增加,WNT3a削弱miR-324-3P对宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移能力的抑制作用。与NC组相比,miR-324-3P mimic组和miR-324-3P mimic+oe-WNT3a组细胞中WNT3a和β-catenin表达降低。而与miR-324-3P mimic组相比,miR-324-3P mimic+oe-WNT3a组WNT3a和β-catenin蛋白表达增加。WNT3a削弱miR-324-3P对β-catenin的抑制作用。结论 miR-324-3P靶向调控WNT3a表达,抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移能力。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学