携带Foxp3基因慢病毒载体的构建

作者：陈春; 李永翔; 罗庆礼

来源：山东医药, 2011, (26): 29-31.

• 叉头样转录因子p3基因
• 慢病毒
• CD4 CD2 5调节性T细胞
• 基因治疗 forkhead box P3
• lentiviral
• CD 4CD 25 regulatory T cells
• geng therapy

目的构建携带叉头样转录因子p3(Foxp3)基因的重组慢病毒载体PWPXL-MOD-Foxp3,并包装成慢病毒,为体外获得CD4 CD2 5调节性T细胞(CD4 CD2 5 Tregs)奠定基础。方法采用双酶切法构建慢病毒表达载体PWPXL-MOD-Foxp3,用磷酸钙沉淀法将包装慢病毒所需的四质粒系统共转染人胚肾细胞293T,慢病毒系统转染48h后收集病毒上清液,纯化、浓缩后采用流式细胞术测定慢病毒滴度。结果重组的慢病毒载体滴度为3.3×108IU/ml。结论成功构建了含有Foxp3基因的高滴度的慢病毒载体,为体外获得CD 4 CD 2 5 Tregs奠定基础。

• 单位
  安徽医科大学; 安徽医科大学第一附属医院