乙型肝炎病毒X蛋白与线粒体延长因子G1相互作用

作者：赵福河; 焦佰海; 焦伯延^*

来源：中华实验和临床病毒学杂志, 2018, 32(04): 352-356.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2018.04.004

• 乙型肝炎病毒X蛋白
• 线粒体延长因子G1
• 相互作用

目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与线粒体延长因子G1(EFG1)在酵母细胞及肝癌细胞内的相互作用。方法 Cyto Trap酵母双杂交法验证HBx蛋白与EFG1蛋白发生相互作用后,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增EFG1基因,并克隆于真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(-)A,确定测序正确并确认EFG1蛋白可在Huh7肝癌细胞表达后,将HBx及EFG1真核表达载体共转染Huh7肝癌细胞,48 h后裂解细胞,免疫共沉淀法(CO-IP)确证HBx蛋白与EFG1蛋白的相互作用。结果 Cyto Trap酵母双杂交法证明HBx蛋白与EFG1蛋白存在相互作用;此外成功构建真核表达载体pc DNA3.1/myc-His(-)A-EFG1,与真核表达载体p FLAG-CMV-2-HBx共转染Huh7肝癌细胞后,HBx蛋白与EFG1蛋白可以相互沉淀。结论本研究证实HBx蛋白与EFG1蛋白存在直接相互作用,为研究HBx蛋白对线粒体蛋白表达的影响提供理论基础,为研究HBx蛋白在肝癌发生过程中的作用提供依据。

• 单位
  济宁市疾病预防控制中心; 深圳市血液中心