ILK SiRNA对TGF-β2诱导的人Tenon囊成纤维细胞增殖和凋亡的影响

作者：王群; 崔丽珺; 刘思伟; 康前雁

来源：国际眼科杂志, 2018, 18(04): 621-625.

DOI：10.3980/j.issn.1672-5123.2018.4.06

• 整合素连接激酶
• 成纤维细胞
• 转化生长因子-β2
• 增殖
• 凋亡

目的:探讨小干扰RNA(the small interference RNA,SiRNA)沉默整合素链接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因对转化生长因子-β2(transforming growth factor beta 2,TGF-β2)诱导的人Tenon囊成纤维细胞(human Tenon fibroblasts,HTFs)增殖和凋亡的影响。方法:体外培养HTFs细胞,波形蛋白(Vimentin)和角蛋白(keratin)免疫荧光染色进行鉴定。实验分组包括NC组:正常对照HTFs;H+T组:HTFs+5μg/L TGF-β2;H+T+NC SiRNA组:HTFs+5μg/L TGF-β2+50nmol/L阴性对照SiRNA;H+T+ILK SiRNA组:HTFs+5μg/L TGF-β2+50nmol/L ILK SiRNA。50nmol/L ILK SiRNA转染HTFs细胞,5μg/LTGF-β2刺激后,分别利用Western-blot检测细胞内ILK的蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖能力,Hoechst33342/PI双染检测细胞凋亡。结果:Western-blot结果显示,TGF-β2可以明显上调HTFs细胞内ILK的表达,ILK SiRNA可以明显抑制TGF-β2诱导的ILK蛋白表达(P<0.05)。CCK-8检测结果显示,5μg/L TGF-β2可以促进HTFs细胞增殖,ILK SiRNA转染后48h,细胞的增殖明显受到抑制,且低于正常对照组(P<0.05)。Hoechst 33342/PI双染结果显示,TGF-β2并不诱导HTFs细胞发生凋亡(P>0.05),但ILK SiRNA可以诱导HTFs细胞发生明显凋亡,并出现少量坏死细胞(P<0.05)。结论:ILK SiRNA可以抑制TGF-β2诱导的HTFs增殖,并诱导HTFs细胞发生凋亡。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院