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摘要
为培育抗虫耐除草剂转基因水稻(Oryza sativa L.),本研究将抗虫融合基因cry1Ab-vip3Af2与耐草甘膦基因cp4-epsps构建在同一T-DNA中，并利用农杆菌侵染法导入秀水134水稻。对获得的转化体的分子特征及抗虫耐除草剂性能进行分析研究，从众多转化体中筛选得到优良转化体VB3。High efficiency TAIL-PCR (Hi-Tail PCR)的分析结果表明，VB3转化体中外源T-DNA的插入位点未编码已知或预测的功能基因。DNA杂交印迹结果显示，VB3转化体的外源T-DNA以单拷贝的形式整合在水稻基因组中。酶联免疫吸附反应和蛋白质免疫印迹分析结果表明，T1、T2代VB3转化体的不同组织中均检测到较高的外源蛋白表达量，且不同世代之间表达量无明显差异。室内生测结果显示，VB3转化体对大螟(Sesamia inferens)、二化螟(Chilo suppressalis)和稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)均表现出较高的抗性。三种靶标昆虫的幼虫取食VB3植物组织后，48 h的死亡率达到90%左右，72 h内全部死亡。草甘膦耐受性能测定结果表明，VB3转化体能够耐受20、40和80 mL·hm-2的草甘膦。综上所述，本研究筛选出的VB3转化体具有较好的生产应用前景。
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