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摘要
目的:通过蛋白组学检测筛选与凋亡相关差异表达蛋白,进行分析及验证,阐述针刀抗膝骨关节炎(KOA)兔软骨细胞凋亡的作用机制。方法:30只新西兰大白兔被随机分为正常组,模型组和针刀组,每组10只。模型组与针刀组参照经典Videman法行KOA造模。针刀组:取兔左膝关节髌韧带和内、外侧副韧带中点,作为针刀进针治疗点,每周1次,连续3周。然后对各组兔膝关节软骨蛋白定量,并通过蛋白质组学筛选出差异表达蛋白,再进一步筛选出与凋亡相关差异表达蛋白。将正常组、模型组和针刀组中与凋亡相关差异表达蛋白取交集,获得3组共有与凋亡相关差异表达蛋白,并对其进行聚类分析。使用HE染色检测软骨细胞的病理变化,运用电子显微镜观察软骨细胞凋亡。运用实时定量PCR (rt-PCR)和蛋白质印迹(WB)检测3组共有与凋亡相关差异表达蛋白的mRNA及蛋白质表达。结果:蛋白印迹和rt-PCR结果提示,与模型组相比,针刀组干预后的TXN、CAP1、FABP3的蛋白和mRNA表达较低,差异有统计学意义(all P<0.05);与模型组相比,针刀组干预后的LTF、SCIN、IL-10的蛋白和mRNA表达较高,差异有统计学意义(all P<0.01)。结论:针刀可能通过调控与凋亡相关差异蛋白TXN、CAP1、FABP3、LTF、SCIN、IL-10的表达,影响软骨细胞的凋亡,发挥抗KOA兔软骨细胞凋亡的作用。
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单位安徽中医药大学; 第二临床医学院
