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摘要
为揭示复合亚氯酸钠（500 mg/L）杀灭烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）的机理，采用荧光定量RT-PCR检测药剂处理后的病毒CP基因和Rep基因表达量，并利用间接酶联免疫吸附法测定了TMV CP的破坏程度；同时接种心叶烟，通过枯斑数统计分析了TMV的侵染活性；利用大片段步移RT-PCR检测TMV相关基因片段的损伤，并使用透射电镜观察药剂处理后病毒粒子被破坏的情况。结果显示：(1)药剂处理30 min可以完全抑制TMV CP基因的表达，处理60 min可完全抑制TMV Rep基因的表达。此时，TMV CP被完全破坏，病毒也完全丧失了对枯斑寄主心叶烟的侵染能力。(2)药剂处理30 min时，TMV的183kDa-1、183kDa-2、183kDa-3、183kDa-4、54kDa、CP&MP基因编码区等6个区域中的183kDa-2、183kDa-4和CP&MP区域首先被损伤，但接种叶叶脉和接种叶叶柄上的这3个区域可以正常扩增。处理45 min时，接种叶叶脉、接种叶叶柄和接种叶上部叶片的183kDa-1、183kDa-3和54kDa区域可以正常扩增，而其他3个区域不能正常扩增；对照叶、茎、接种叶下部叶片的6个区域均不能正常扩增。处理60 min时，各部位的基因组片段扩增结果均呈阴性。因此，可以确定药剂处理导致的CP损伤是造成病毒侵染性丧失的主要因素，核酸损伤与病毒失活无关。(3)透射电镜观察发现，药剂处理1.5 h后病毒粒体完全断裂成碎片状。
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