小鼠B细胞亚群及其组织分布的流式细胞检测方法的优化

作者：郭冉; 李芸芊; 屠鹏飞^*; 朱枝祥^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2020, 34(04): 302-310.

• B细胞亚群
• 标志物
• 组织分布
• 流式细胞术

目的优化B细胞亚群及其组织分布的流式细胞分析的荧光染色方案,以用于免疫调控药物的活性评价。方法取小鼠外周血、腹膜腔细胞、脾细胞、淋巴结细胞和骨髓细胞,分别通过3种荧光抗体染色方案对各种细胞进行染色:①抗B220,CD5和CD11b的荧光抗体及7-氨基放线菌素D(7-AAD)染色;②抗B220,CD43,CD93,CD23和IgM的荧光抗体及7-AAD染色;③抗B220,CD27和CD138的荧光抗体及7-AAD染色。然后利用流式细胞术分析B细胞亚群,通过优化的表面标志物组合确定各种B细胞亚群,再统计各种B细胞亚群在多种组织中的分布。结果第①种染色方案可区分B1a,B1b和B2细胞;第②种染色方案可区分原始B细胞、不成熟和成熟B细胞;第③种染色方案可区分记忆性B细胞和浆细胞。外周血中主要包含成熟B细胞和一种特殊的不成熟B细胞;腹膜腔中主要包含B1a细胞和成熟B细胞;脾中主要包含成熟B细胞、边缘区B细胞及T1和T2期不成熟B细胞;淋巴结中主要包含成熟B细胞;骨髓中包含各种发育阶段B细胞,主要包含前B细胞(pre-B细胞)和T1期不成熟B细胞。记忆性B细胞和浆细胞在各种组织中都只占B细胞的较小比例。结论本研究采用的荧光染色方案可特异准确地分析B细胞亚群及其组织分布,可用于免疫调控药物的活性评价。

• 单位
  北京中医药大学