核盘菌多聚半乳糖醛酸酶基因克隆及诱饵蛋白表达载体构建

作者：周晓婴; 陈松; 戚存扣

来源：江苏农业科学, 2010, (04): 25-28.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2010.04.047

• 核盘菌
• 多聚半乳糖醛酸酶基因
• 酵母双杂交
• 克隆
• 诱饵蛋白载体

真菌多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PG IP)能够特异性识别真菌分泌的降解植物细胞壁的主要物质多聚半乳糖醛酸酶(PG)并抑制其活性。目前,酵母双杂交技术是快速、有效获取植物PG IP的主要途径,而其前提是要获得真菌PG的酵母诱饵载体。本研究以核盘菌的PG cDNA为模板,经PCR扩增获得1 125 bp片断,进一步将其克隆到pEASY-T1载体上。以克隆了目的基因的pEASY-T1质粒为模板,用含NdeⅠ和SalⅠ位点的引物对PG-F2/PG-R2扩增获得1 125 bp大小的目的片段,将其连接到pEASY-T1上生成pEASY-PG。用NdeⅠ和SalⅠ双酶切pEASY-PG,回收1 125 b...

• 单位
  南京农业大学; 江苏省农业科学院; 作物遗传与种质创新国家重点实验室