沉默Bmi-1表达对K562/ADM细胞体内外增殖能力的影响

作者:刘奔; 刘玉娇; 刘丹丹; 赵宝霞; 张凯; 井如男; 懂思聪; 孟秀香*
来源:中国实验血液学杂志, 2020, 28(02): 446-452.
DOI:10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2020.02.015

摘要

目的:观察沉默Bmi-1表达对慢性髓系白血病阿霉素耐药细胞株-K562/ADM细胞增殖的影响并初步探讨其分子机制。方法:将Bmi-1小干扰RNA(siRNA)序列转染到K562/ADM细胞中降低其Bmi-1的表达;采用MTT法、软琼脂集落形成实验、裸鼠成瘤实验检测沉默Bmi-1表达对K562/ADM细胞体内外增殖能力的影响;应用Western blot检测Bmi-1、PTEN、p-AKT等蛋白表达;免疫组织化学实验分析Bmi-1和Ki-67的表达情况。结果:Bmi-1基因的沉默能够抑制K562/ADM细胞的增殖活性、集落形成及裸鼠成瘤能力;Bmi-1基因沉默后,干扰组PTEN表达明显升高,而p-AKT活性明显下降;p-AKT抑制剂-LY294002处理K562/ADM细胞后,p-AKT表达降低,集落形成及裸鼠成瘤能力相比K562/ADM细胞降低;PTEN抑制剂-Bpv处理K562/ADM-S1细胞后,PTEN的表达降低,而p-AKT表达、集落形成及裸鼠成瘤能力得以重塑; Bmi-1基因沉默使得肿瘤组织中Bmi-1与Ki-67表达均下降。结论:Bmi-1基因有可能参与了对K562/ADM的体内外增殖能力的调控,PTEN/pAKT信号通路可能涉及其中。

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