清肾颗粒含药血清通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通路减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化（英文）

作者：张磊; 金华; 王东; 程梦; 李卓娅; 王亿平^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(07): 1234-1245.

• 清肾颗粒
• NF-κB信号通路
• HK-2细胞
• 上皮-间充质转化
• 氧化应激

目的：探讨清肾颗粒含药血清是否能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通路的活化，从而减轻高糖诱导的HK-2细胞转分化。方法：使用高效液相色谱法分析清肾颗粒中的活性成分。选用同代HK-2细胞随机分为7组，包括空白对照组，渗透压对照组，高糖组，低、中、高剂量清肾颗粒组，以及吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）组。采用倒置相差显微镜观察细胞形态学改变；MTT法测定各组细胞活性；流式细胞术检测HK-2细胞中活性氧（ROS）含量，ELISA法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；电泳迁移率变动分析（EMSA）检测HK-2细胞中NF-κB p65的DNA结合活性变化；Western blot法检测HK-2细胞中NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1和ICAM-1的蛋白水平；免疫荧光法检测HK-2细胞中NF-κB p65和α-SMA的蛋白表达情况。结果：通过高效液相色谱法初步明确清肾颗粒中含有绿原酸、盐酸小檗碱、大车前苷、滨蒿内酯、6,7-二甲氧基香豆素、表小檗碱、黄连碱、丹酚酸B、巴马汀、益母草碱、大黄酸和丹参酮IIA。高糖诱导的HK-2细胞与空白对照组比较ROS和MDA水平显著升高（P<0.05）,SOD活性显著降低（P<0.05）,NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著升高（P<0.05）。清肾颗粒含药血清干预后高糖诱导的HK-2细胞中ROS和MDA水平显著下降（P<0.05）,SOD活性显著升高（P<0.05）,NF-κB p65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1和α-SMA蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论：清肾颗粒含药血清能通过抑制氧化应激介导的NF-κB信号通道的活化，减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化。

• 单位
  安徽中医药大学第一附属医院