UPLC-MS/MS多组分快速测定结合化学模式识别的玉叶清火片质量控制研究

作者：覃华亮; 覃子龙^*; 符传武; 谢金利

来源：中草药, 2019, 50(22): 5470-5477.

• 玉叶清火片
• UPLC-MS/MS
• 化学模式识别
• 质量控制
• 聚类分析
• 主成分分析
• 正交偏最小二乘法-判别分析
• 京尼平苷酸
• 绿原酸
• 山栀苷甲酯
• 3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸
• 栀子苷
• 玉叶金花苷酸甲酯
• β-蜕皮甾酮
• 穿心莲内酯
• 蟛蜞菊内酯
• 脱水穿心莲内酯

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定玉叶清火片中10种指标成分(京尼平苷酸、绿原酸、山栀苷甲酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、栀子苷、玉叶金花苷酸甲酯、β-蜕皮甾酮、穿心莲内酯、蟛蜞菊内酯、脱水穿心莲内酯)的含量,结合化学模式识别方法对其进行系统、全面和科学的质量评价。方法安捷伦Zorbax SB C18柱(50 mm×3.0 mm,1.8μm);流动相为甲醇-0.1%乙酸(含0.02 mol/L乙酸铵)水溶液,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min;质谱采用ESI正、负离子同时采集,多反应监测(MRM)模式扫描,并对定量测定结果进行聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),综合评价其质量的差异性。结果在优化的色谱质谱条件下,10种成分分别在0.352 5～14.100 0、5.402～270.100、0.2058～8.2320、1.050～42.020、4.020～160.800、4.328～173.100、2.044～204.400、2.251～225.000、0.2328～9.312 0、4.708～188.300μg/mL线性关系良好(r>0.999 1),平均加样回收率95.02%～99.66%(RSD<3.0%);定量分析结果表明大多数批次药物质量较为稳定;但通过CA和PCA均发现不同批次药品质量之间仍然存在微小差异,最后通过OPLS-DA筛出引起批次间质量差异的6个标志性成分,分别是穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、玉叶金花苷酸甲酯、山栀苷甲酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、绿原酸。结论实验建立的方法简便、灵敏、高效,可用于玉叶清火片中多种主要活性成分的快速测定;测定结果结合化学模式识别技术可从整体上综合评价药物质量,为玉叶清火片的质量控制研究提供新的科学依据和数据处理方法。