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摘要
α-淀粉酶是一种可以水解淀粉中α-1,4-糖苷键的水解酶，它将大分子的淀粉水解为小分子的葡萄糖。对来自蜜蜂的α-淀粉酶进行密码子优化和全基因合成，将合成后的基因克隆至穿梭载体pYES2-α-factor,转化进宿主菌INVSc1。通过碘染法筛选鉴定阳性克隆子，确定重组菌株最佳诱导后产酶时间为22 h,利用DNS法确定该酶最适pH为9.0,最适温度为50℃,在最适条件下(28℃,诱导时间22 h)诱导，重组菌表达α-淀粉酶最大产酶浓度为2 809.1 U/mL。诱导表达收集其上清粗酶液后，经SDS-PAGE电泳，测定其分子量大约为60 kDa,比预期分子量稍大，可能与糖基化有关。
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