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摘要
目的观察不同碘营养水平下大鼠乳腺组织磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K )、蛋白激酶B(AKT)、钠碘转运体(NIS)mRNA和蛋白的表达, 以及血清胰岛素样生长因子I(IGF-1)的变化, 探讨该通路在哺乳期乳腺摄碘过程中所起到的作用。方法 Wistar大鼠130只(雌鼠100只, 雄鼠30只), 按体质量采用随机数字表法将雌鼠分为5组:①对照组(NI组), 普通饲料+含碘50 μg/L去离子水;②低碘1组(LI1组), 低碘饲料+去离子水; ③低碘2组(LI2组), 低碘饲料+含碘5 μg/L去离子水;④高碘1组(HI1组), 普通饲料+含碘3 000 μg/L去离子水;⑤高碘2组(HI2组), 普通饲料+含碘10 000 μg/L去离子水。每组20只, 饲养3个月后, 将雌鼠与雄鼠合笼, 交配后, 取出雄鼠, 每只雌鼠单独喂养, 在产后10 d时, 采集尿样, 测定哺乳期大鼠尿碘, 处死后取哺乳期大鼠的血液、乳腺组织。酶联免疫吸附法测定哺乳期大鼠血清IGF-1水平;实时荧光定量PCR法检测乳腺PI3K、AKT、NIS mRNA表达;蛋白印迹法检测乳腺PI3K、总AKT、磷酸化AKT (p-AKT)和NIS蛋白表达。结果 LI1、LI2组哺乳期大鼠尿碘中位数(3.16、6.36 μg/L)明显低于NI组(162.59 μg/L), HI1、HI2组(2 356.27、11 507.29 μg/L)明显高于NI组, 差异均有统计学意义(P均< 0.01)。与NI组[(8.84 ± 2.12)μg/L]比较, LI1、LI2组哺乳期大鼠血清IGF-1含量[(13.30 ± 2.37)、(10.90 ± 1.92)μg/L]明显升高(P均< 0.01)。实时荧光定量PCR法检测结果显示, 哺乳期大鼠乳腺组织NIS、AKT、PI3K mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F= 14.916、 36.477、14.994, P均< 0.01)。其中NIS mRNA表达在LI1、LI2组(0.75 ± 0.40、0.89 ± 0.51)明显高于NI组(0.53 ± 0.31), HI2组(0.30 ± 0.24)明显低于NI组(P < 0.05或< 0.01);AKT mRNA表达在LI1、LI2组(0.90 ± 0.19、0.64 ± 0.22)均明显高于NI组(0.43 ± 0.22), HI2组(0.29 ± 0.15)明显低于NI组(P < 0.05或< 0.01);PI3K mRNA表达在LI1组(0.85 ± 0.42)明显高于NI组(0.50 ± 0.24), HI2组(0.28 ± 0.10)明显低于NI组(P均< 0.01)。蛋白印迹法检测结果显示, 哺乳期大鼠乳腺NIS蛋白表达组间比较差异有统计学意义(F= 4.510, P < 0.01), 其中LI1组(1.67 ± 0.97)明显高于NI组(0.87 ± 0.43, P < 0.05);p-AKT蛋白表达组间比较差异有统计学意义(F= 3.528, P < 0.05), 其中HI2组(1.10 ± 0.30)明显高于NI组(0.75 ± 0.23, P < 0.05);总AKT、PI3K蛋白表达组间比较差异无统计学意义(F= 0.558、1.319, P均> 0.05)。结论 PI3K-AKT信号通路对乳腺NIS表达的抑制作用弱于碘摄入量本身的作用, 而功能性p-AKT表达量随着碘浓度的逐渐增加呈上升趋势, 表现出抑制哺乳期乳腺NIS表达的作用。
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