UPLC-MS/MS法快速检测小鼠血清中三甲胺和氧化三甲胺

作者：徐岳松; 赵宇峰^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, Z1: 2369-2375.

DOI：10.13417/j.gab.040.002369

• 三甲胺
• 氧化三甲胺
• 超高效液相色谱串联三重四极杆质谱

血清中三甲胺(trimethylamine, TMA)和氧化三甲胺(trimethylamine oxide, TMAO)的水平与多种代谢性疾病相关。为实现TMA和TMAO的简便分析,本研究建立了一种快速、低消耗地测定小鼠血清样本中TMA和TMAO含量的超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(ultra performance liquid chromatography tandem triple quadrupole mass spectrometry, UPLC-MS/MS)方法。选用Acquity UPLC BEH HILIC色谱柱,以含0.1%甲酸和10 mmol/L甲酸铵的水溶液及含0.1%甲酸和10 mmol/L甲酸铵的95%乙腈溶液为流动相进行洗脱,采用在电喷雾正离子模式下以多反应监控模式(multiple reactions monitoring, MRM)对TMA和TMAO进行定量分析,整个分析过程在6 min内完成。经方法学考查,TMA和TMAO分别在19.33～618.5 ng/mL和62.5～1 000 ng/mL范围内呈现良好的线性关系(R2≥0.996),检测限分别为5.79 ng/m L和0.24 ng/mL,定量限分别为10.05 ng/mL和0.98 ng/mL。该方法的回收率在90%～104%,日内和日间精密度分别小于6.55%和10%,满足生物分析的要求。运用该方法分析了益生元干预前后高胆碱饮食Apoe-/-小鼠血清中TMA和TMAO的水平变化,结果表明,益生元可在一定程度上改善高胆碱饮食造成的小鼠TMA和TMAO代谢异常。本研究结果为分析TMA和TMAO含量水平与代谢性疾病的关系提供一种更准确、高效、低耗的分析方法。

• 单位
  微生物代谢国家重点实验室; 上海交通大学