摘要
目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脓毒症血清诱导的血管内皮细胞高通透性的影响及其机制。方法:收集本院脓毒症患者和健康志愿者血清。体外培养人脐静脉内皮细胞EA.hy926,将细胞分为空白对照组(Blank)、实验对照组(CON)、脓毒症组(Sep)、NAC低剂量组(NAC-L)、NAC高剂量组(NAC-H)及高剂量NAC联合整合素金属蛋白酶10(ADAM10)抑制剂GI254023X组(NAC-H+GI254023X)。分组处理后,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性;qRT-PCR法检测各组细胞ADAM10 mRNA表达水平;Transwell小室法检测各组单层细胞通透性;跨内皮细胞电阻法检测各组细胞跨膜电阻(TEER)值;Western blot法检测各组细胞ADAM10、Occludin、ZO-1及VE-cadherin蛋白表达水平。结果:与Blank组和CON组比较,Sep组细胞增殖活性、TEER值、VE-cadherin、Occludin及ZO-1蛋白表达水平明显降低,而ADAM10 mRNA和蛋白表达量、细胞通透性明显升高(P<0.05);与Sep组比较,NAC-H组细胞增殖活性、TEER值、VE-cadherin、Occludin及ZO-1蛋白表达水平明显升高,而ADAM10 mRNA和蛋白表达量、细胞通透性明显降低(P<0.05),而NAC-L组的差异无统计学意义(P>0.05);ADAM10抑制剂GI254023X能显著增强NAC对脓毒症血清诱导人脐静脉内皮细胞EA.hy926高通透性的抑制作用。结论:NAC通过下调ADAM10的表达水平,抑制脓毒症血清诱导的人脐静脉内皮细胞高通透性。
-
单位连云港市第一人民医院