山葡萄4CL基因克隆与表达分析

作者：**; 刘海峰^*

来源：扬州大学学报（农业与生命科学版）, 2019, 40(05): 20-25.

DOI：10.16872/j.cnki.1671-4652.2019.05.003

• 山葡萄
• 果皮着色
• 4CL基因
• 原核表达
• 表达特征

山葡萄(Vitis amurensis)果皮颜色是影响果实品质的重要因素之一。果皮颜色主要由花色苷决定, 4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)是花色苷合成关键酶。通过RT-PCR技术获得山葡萄4CL基因的全长cDNA为1 772 bp,开放阅读框(ORF)为1 635 bp,编码544个氨基酸多肽,分子量为59.63 ku,等电点为9.02。用RT-qPCR技术,分析4CL在山葡萄果实着色8个发育期的表达差异, 4CL基因表达呈"低-高-低"的变化趋势,果皮全着色(100%)期达峰值,完熟期呈下降趋势。构建原核表达重组质粒pET28a-4CL,并在大肠埃希菌(E.coli) BL21表达4CL,与预期大小一致。

• 单位
  延边大学