微小RNA-25靶向大型肿瘤抑制因子2对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

作者：吴万庆; 崔小兵; 傅聿铭; 吴刚; 陈广法

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(07): 1152-1155.

• 微小RNA-25
• 大型肿瘤抑制因子2
• 结肠癌
• 增殖

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-25靶向大型肿瘤抑制因子2(LATS2)对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响。方法选取人结肠癌细胞HT29,转染Neg-miR、pre-miR-25、anti-miR-25,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测miR-25表达,Western blot检测LATS2蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡。双荧光素酶报告基因实验验证miR-25与LATS2的靶向关系。结果与Neg-miR组比较,pre-miR-25组miR-25表达上调(0.37±0.08比0.78±0.14)(t=3.871,P=0.028),LATS2蛋白表达降低(157.32±32.11比56.47±11.35)(t=4.012,P=0.026);anti-miR-25组miR-25表达降低(0.37±0.08比0.11±0.04)(t=4.275,P=0.025),LATS2蛋白表达增高(157.32±32.11比382.74±55.28)(t=4.663,P=0.021)。与Neg-miR组比较,pre-miR-25组细胞增殖活性增高(0.37±0.04比0.48±0.02,0.62±0.05比0.90±0.02,0.89±0.03比1.10±0.04)(t=2.998、3.372、3.012,P=0.045、0.035、0.041),同时凋亡率降低[(8.52±1.11)%比(2.94±0.81)%,t=4.425,P=0.018];anti-miR-25组细胞增殖活性降低(0.37±0.04比0.30±0.03,0.62±0.05比0.42±0.04,0.89±0.03比0.50±0.05)(t=2.895、3.237、4.002,P=0.048、0.038、0.021),同时凋亡率降低[(8.52±1.11)%比(15.01±2.53)%,t=4.518,P=0.016]。miRNA靶基因预测软件检测结果显示,miR-25能作用于LATS2 3’端非编码区域(3’UTR)。与转染Neg-miR比较,共转染pre-miR-25与LATS2-wt可使HT29荧光素酶活性降低(t=3.285,P=0.033)。结论 miR-25可通过靶向LATS2调控结肠癌细胞增殖及凋亡。

• 单位
  郑州大学第五附属医院; 河南省人民医院; 开封市儿童医院