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摘要
为制备猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)M蛋白的特异性单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb),通过大肠杆菌表达系统截短表达了PDCoV M蛋白并对其进行了纯化，将纯化的M蛋白免疫BALB/c小鼠，通过细胞融合、筛选及亚克隆，获得稳定分泌M蛋白特异性单克隆抗体的4株杂交瘤细胞株，分别命名为4A6、4G3、5F3和5G8。抗体亚型鉴定均为IgG2a,轻链均为kappa链。用间接ELISA方法测得杂交瘤细胞株上清效价达到1∶1 000,小鼠腹水的抗体效价可达1∶204 800。Western blot结果显示，4株单克隆抗体均可与PDCoV发生特异性反应；间接ELISA结果显示，mAb能特异性识别PDCoV M,而与PDCoV N不反应；IFA结果显现，4株单克隆抗体均能特异性识别细胞中的PDCoV。结果表明，制备的PDCoV M蛋白单克隆抗体为后续进一步建立PDCoV诊断方法及M蛋白相关基础研究提供了重要研究材料。
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