小鼠pcDNA3.1/CXCL14真核表达载体的构建、表达及意义

作者：杨帆; 张黎军; 李芳芳; 蒋小波

来源：医学研究杂志, 2013, (05): 82-86.

• CXCL14
• 真核表达载体
• 293T细胞
• 胰岛素抵抗 CXCL14
• Eukaryotic expression vector
• 293T cells
• Insulin resistance

目的构建小鼠pcDNA3.1/CXCL14真核表达载体,观察其在293T细胞中的表达,为进一步探讨CXCL14对脂肪细胞因子、氧化应激及胰岛素信号转导通路的影响提供工具。方法从C57/BL胚鼠肝脏组织中抽提RNA,RT-PCR扩增CX-CL14基因片段,并将其插入pcDNA3.1进行测序,鉴定正确构建pcDNA3.1/CXCL14后转染293T细胞,用RT-PCR法和Westernblot法分别从mRNA水平和蛋白质水平分别检测CXCL14的表达情况。结果重构质粒经PCR、限制性核酸内切酶NheⅠ和XhoⅠ酶切以及DNA序列分析鉴定,表明真核表达载体构建正确;以脂质体法转染293T细胞后,RT...

• 单位
  武汉大学人民医院