摘要

目的:通过体外培养牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF),用牙龈卟啉单胞菌(PorPhyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(LPoPolysaccharide,LPS)刺激牙龈成纤维细胞建立牙周炎细胞模型,采用不同能量密度低水平激光(low lever light therapy,LLLT)照射牙周炎细胞模型,通过检测细胞中骨膜蛋白和Ⅰ型胶原表达量的变化,研究LLLT对细胞外基质蛋白表达的影响。方法:(1)组织块法提取原代牙龈成纤维细胞,免疫组织化学法鉴定细胞来源。(2) Real-time PCR法检测Pg.LPS刺激HGF后24h内IL-6的mRNA表达的情况,以及2 h、4 h、6 h、12 h、24 h时间点骨膜蛋白和I型胶原的表达情况。(3)不同能量密度2、4和8 J/cm2的波长650 nm低能量激光照射牙周炎细胞模型,Real-time PCR法用于检测LLLT作用下细胞内骨膜蛋白和I型胶原基因水平的变化。结果:组织块法可成功提取牙龈成纤维细胞。Real-time PCR检测结果示:Pg.LPS刺激后IL-6表达显著增加,HGF处于炎症状态;LLLT照射后骨膜蛋白和I型胶原的表达明显高于牙周炎组(P <0.05)。结论:(1)组织块法可成功培养原代牙龈成纤维细胞,细胞增殖较快,对干预反应好,能满足实验需求。(2)2μg/ml Pg.LPS能促进牙龈成纤维细胞大量分泌炎症因子,成功建立牙周炎细胞模型。(3)在一定的激光参数范围内(2~8J/cm2),LLLT能促进细胞外基质蛋白的分泌。

  • 单位
    天津市第三中心医院