摘要
目的:利用脂质体可同时装载水溶性成分和脂溶性成分的特点,制备载Survivin-siRNA和蛇床子阳离子脂质体纳米粒。方法:以膜材比、药脂比、超声时间和旋蒸温度为考察因素,采用正交试验法优化蛇床子素阳离子脂质体制备工艺。采用控制变量法以电位和粒径为指标,对HA-siRNA与鱼精蛋白体积比和HA-siRNA-鱼精蛋白复合物与脂质体比例进行考察。电位粒径仪测定其粒径和Zeta电位,透射电镜观察其形状;采用酶标仪测定不同浓度FAM-Survivin-siRNA标准溶液吸光度,计算载FAM-Survivin-siRNA与蛇床子素阳离子脂质体纳米粒的包封率。结果:采用薄膜分散法,通过正交试验得载蛇床子素阳离子脂质体最佳工艺为:膜材比3∶1,药脂比1∶5,旋蒸温度30℃,超声时间70 min包封率可达78.34%,通过控制变量法得载FAM-Survivin-siRNA与蛇床子素阳离子脂质体纳米粒最佳工艺为:Survivin-siRNA与鱼精蛋白体积比1∶1,鱼精蛋白复合物25μg,加入50μL阳离子脂质体。经电位粒径仪测得粒径(132.3±0.2)nm,Zeta电位(43.15±0.05)mV,其形状呈不规则的类圆形;根据标准曲线测得共载Survivin-siRNA与蛇床子素阳离子脂质体纳米粒的包封率为(81.34±0.04)%。结论:经过工艺优化制备的载Survivin-siRNA和蛇床子素阳离子脂质体纳米粒具有较好的包封率、粒径和Zeta电位。
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