摘要
目的优选多聚赖氨酸(poly-D-lysine,PDL)在大鼠海马神经元原代培养中的最佳工作浓度。方法颈椎脱臼处死孕18 d的Wistar大鼠3只,取出胚胎并分离脑组织。迅速分离海马组织,胰酶消化,吹打并以合适浓度(30万/3.5 cm皿)接种于0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1、2 mg/m L的PDL工作浓度包被的培养皿中,采用相差显微镜观察神经元形态,同时采用CCK-8试剂盒进行神经元活性检测。结果神经元接种4 h后贴壁,1 d后突起发生,4 d后与周围神经元形成联系,7 d后成熟并形成网状联系。PDL最佳工作浓度范围位于0.250.75 mg/m L,神经元在此浓度范围内生长状态及活性最佳。结论通过实验确定了PDL最佳工作浓度,对于神经元培养有重要意义。
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单位天津生物工程职业技术学院; 山东大学