猪溶血素突变体的构建及活性评价

作者：任志强; 郑玉玲; 甘淑珍; 律清宇; 郝淮杰; 姜永强; 宗浩

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (06): 580-582.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006436

• 猪溶血素
• 定点突变
• 猪链球菌 suilysin
• site-directed mutagenesis
• Streptococcus suis

目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价。方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸。重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶血活性和免疫原性。结果:获得三种猪溶素突变体,SLY(P353A),SLY(P353L)和SLY(P353V)。溶血试证明SLY(P353V)无溶血活性,蛋白质免疫印迹和动物实验显示SLY(P353V)具有免疫原性。结论:猪溶素突变体SLY(P353V)无溶血活性,有免疫原性。

• 单位
  中国科学院微生物研究所; 军事医学科学院; 生命科学学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 四川师范大学