草莓6种病毒多重PCR快速检测方法的建立

作者：李素; 许腾飞; 侯圣凡; 董振飞; 赵晓丽; 李楠; 王红清^*

来源：中国农业大学学报, 2023, 28(11): 116-124.

• 草莓
• 多重PCR
• 草莓镶脉病毒
• 草莓斑驳病毒
• 草莓轻型黄边病毒
• 草莓白化病毒
• 草莓病毒1
• 芸薹黄化病毒

为快速鉴定草莓病毒病种类以预防病毒病扩散，根据草莓镶脉病毒(strawberry vein banding virus, SVBV)、草莓斑驳病毒(strawberry mottle virus, SMoV)、草莓轻型黄边病毒(strawberry mild yellow edge virus, SMYEV)、草莓白化病毒(strawberry pallidosis-associated virus, SPaV)、草莓病毒1(strawberry virus 1,StrV-1)和芸薹黄化病毒(brassica yellows virus, BrYV)的基因保守区域设计特异性引物，建立了能够同时检测这6种病毒的多重PCR方法。该多重PCR反应体系中，2×SanTaq PCR Master Mix用量为10μL,上下游引物(10μmol/L)用量为4μL,其中SVBV为0.25μL、SMoV为0.50μL、SMYEV为0.10μL、SPaV为0.15μL、StrV-1为0.50μL和BrYV为0.50μL,模板1μL,ddH2O为5μL,总体积20μL。多重PCR反应程序设定为：94℃预变性5 min, 94℃变性30 s, 53℃退火30 s, 72℃延伸120 s,最后72℃延伸10 min,循环数为35。该检测体系的灵敏度可以达到107 copies/μL。该多重PCR方法可以同时实现6种草莓病毒的高效快速检测，为草莓病毒病的早期发现和针对性防治提供了技术支持。

• 单位
  中国农业大学