摘要
目的:鉴定正常生育男性的精浆蛋白质。方法:3例正常健康已生育的自愿者精液标本通过Percoll分离获取精浆,等量混合后在SDS-PAGE上进行分离,切胶取条带进行胶内酶解,抽提肽段后利用shotgun蛋白组学策略鉴定蛋白质。结果:正常生育男性精浆鉴定出331种蛋白质,相对分子质量范围8000~572068,等电点范围4.36~11.05;这些蛋白质按功能和生物进程归类,大致有51个(15.4%)运输蛋白质,11个(3.32%)细胞运动蛋白,63个(19.03%)信号转导蛋白质,147个(44.4%)蛋白酶及38个(11.5%)酶调节蛋白质,21个(6.3%)细胞凋亡蛋白,12个(3.62%)结构和支撑蛋白质,59个(17.8%)分子功能未知蛋白质。结论:shotgun蛋白组学策略是鉴定蛋白质的一个较好的方法。膜联蛋白及相关蛋白、Ras相关蛋白Rab是鉴定到的信号转导蛋白中的主要成员,因此推测钙离子和G蛋白信号通路是精子胞外信号传递到胞内的最重要途径,但是这些蛋白间的相互作用还不清楚。另外,精浆中鉴定到了大量的酶类,可能与维持精子活力和代谢有密切关系。
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单位南方医科大学; 中国人民解放军总医院; 南方医院