摘要

目的:响应面法优化纤维素酶协同超声波辅助提取北沙参多糖(Glehniae Radix polysaccharides,GLP)的工艺条件,并对其理化性质和免疫调节活性进行研究。方法:选择酶解时间、料液比、超声时间、超声温度、纤维素酶添加量为影响因素,以GLP的得率为评价指标,进行单因素考察。在此基础上,利用Box-Behnken响应面法进行提取工艺的优化。采用扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、热重分析-差示扫描量热仪(Thermogravimetric Analysis-Differential Scanning Calorimetry, TGA-DSC)、傅里叶变换红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectroscopy,FT-IR)以及高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对GLP的理化性质进行分析,通过体外试验评估其对RAW 264.7巨噬细胞的免疫调节作用。结果:GLP的最优提取工艺:酶解时间112 min、料液比1:30 g·mL-1、超声时间41 min、超声温度65℃、酶添加量2%。在此条件下,GLP的得率为39.58%±0.90%。此外,GLP主要由葡萄糖组成,热稳定性良好。体外免疫调节活性结果表明,在0.5~250μg·mL-1浓度范围内,GLP均能显著(P<0.05)促进RAW 264.7巨噬细胞的增殖,且在0.5~10μg·mL-1浓度范围内,显著(P<0.05)抑制LPS诱导的巨噬细胞过度活化。结论:该工艺稳定、可行,北沙参多糖GLP得率相对较高,且具有一定的免疫调节活性。

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