烟草NtMYB59基因克隆及过表达对绿原酸含量的影响

作者:王中; 赵利杰; 刘萍萍; 郑美; 谢小东; 王晨; 张剑锋; 罗朝鹏; 杨军; 武明珠
来源:烟草科技, 2021, 54(05): 1-7.
DOI:10.16135/j.issn1002-0861.2020.0288

摘要

MYB转录因子(MYB transcription factors)在植物生长发育及应对生物及非生物胁迫中具有重要作用。为了揭示MYB转录因子在烟草中的功能,通过同源克隆方法从普通烟草品种K326中克隆得到1个MYB转录因子。对基因序列和其编码的氨基酸序列进行生物学分析发现,该基因具有典型的MYB结构域,将其命名为NtMYB59。其CDS全长为666 bp,共编码221个氨基酸,预测分子量为26.26 kDa,等电点为8.33。二级结构分析发现,NtMYB59蛋白含有MYB蛋白特有螺旋-转角-螺旋结构域;蛋白三级结构预测发现,其符合MYB基因家族的结构特征。利用实时荧光定量PCR分析NtMYB59基因在不同组织中的表达量,结果表明该基因具有组织表达差异性,其在叶片、侧根、须根及花中的表达量较高,在茎秆、茎节和腋芽中的表达量较低。通过测定K326和转NtMYB59基因的烟草叶片中绿原酸含量(质量分数)发现,过表达NtMYB59基因后烟草绿原酸含量显著提高,说明NtMYB59转录因子基因能够调控烟草中绿原酸含量。