雷公藤红素抑制3T3-L1成脂分化的作用及机制研究

作者：岳兰昕; 沈磐; 周磊; 黄从书; 周维; 高月^*

来源：中国药物警戒, 2023, 1-21.

DOI：10.19803/j.1672-8629.20230708

• 雷公藤红素
• 前体脂肪细胞
• 成脂分化
• 脂代谢
• 油红O染色
• mmu-miR-5121

目的 研究雷公藤红素(celastrol，Cela)对前体脂肪细胞(3T3-L1)成脂分化的抑制作用及其具体机制。方法 采用CCK-8法确定雷公藤红素处理3T3-L1细胞的最佳浓度；油红O染色及免疫荧光法(脂肪细胞标志蛋白Perilipin1，Adiponectin)检测雷公藤红素对3T3-L1成脂分化不同时期的抑制作用；WesternBlot(WB)检测不同浓度雷公藤红素处理后3T3-L1细胞中调控脂代谢以及分化相关蛋白的表达；对未分化(Con)、分化第1天(MDI)、分化第1天同时给药250nmol·L-1 雷公藤红素(MCT)的3T3-L1细胞进行WB检测以及microRNA(miRNA)测序，qPCR验证筛选得到的miRNA，进行KEGG与GO富集分析；过表达mmu-miR-5121mimics和inhibitor，WB检测相关蛋白的变化，油红O染色检测分化结果。结果Cela处理3T3-L1细胞的最佳浓度为250 nmol·L-1和500 nmol·L-1；油红O染色及免疫荧光结果表明250nmol·L-1与500 nmol·L-1Cela对3T3-L1成脂分化均有显著抑制作用，250 nmol·L-1在3T3-L1成脂分化早期(第1天)便能显著抑制3T3-L1成脂分化；250 nmol·L-1Cela处理3T3-L1 24 h后，能显著抑制3T3-L1中DFCP1、FAS、ACC、PPARγ等蛋白的表达；分化第1天FAS与ACC表达升高，采用250 nmol·L-1 Cela处理后，ACC、FAS蛋白表达显著降低；miRNA测序筛选后qPCR验证结果表明mmu-miR-5121在分化第1天减少，但Cela处理后含量增加。转染5121 inhibitor提高了FAS与ACC的含量，5121 mimics则呈现相反作用。单独转染5121 inhibitor可使得3T3-L1分化成熟，而分化同时添加5121 mimics可以有效抑制分化。并且250 nmol·L-1 Cela可以抑制5121 inhibitor引起的分化。结论 250 nmol·L-1雷公藤红素作用于3T3-L1成脂分化早期可显著抑制前体脂肪细胞分化，其可能通过上调mmu-miR-5121的含量，抑制FAS与ACC的表达发挥作用。

• 单位
  天津中医药大学