miR-543靶向TCF7L2调控BMSCs成脂分化的实验研究

作者：封宝红; 喻业安; 晏莉; 伍军; 张艳霞; 朱戈丽

来源：中国骨质疏松杂志, 2022, 28(12): 1770-1776.

• 微小RNA-543
• 转录因子7类似物2
• 骨髓间充质干细胞
• 成脂分化
• 大鼠

目的 探讨微小RNA-543(miR-543)靶向调控转录因子7类似物2(TCF7L2)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成脂分化的影响。方法 分离并鉴定大鼠BMSCs,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测BMSCs成脂分化诱导过程中miR-543的表达变化；体外培养BMSCs细胞，对BMSCs细胞进行干预，过表达miR-543、抑制TCF7L2表达或同时过表达miR-543与TCF7L2,使用成脂分化诱导培养基培养，油红O染色检测BMSCs成脂分化；免疫印迹法检测BMSCs细胞TCF7L2、脂肪细胞蛋白2(aP2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-543与TCF7L2的靶向关系。结果 成功分离大鼠BMSCs; BMSCs成脂分化诱导处理1、2、3、4、5 d后miR-543表达水平降低；双荧光素酶报告基因实验证实miR-543与TCF7L2存在靶向关系；过表达miR-543或抑制TCF7L2表达，BMSCs油红O染色后OD值、aP2、PPAR-γ、C/EBPα蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达TCF7L2可部分逆转过表达miR-543对BMSCs细胞成脂分化的抑制作用(P<0.05)。结论 miR-543在大鼠BMSCs细胞成脂分化过程中下调表达，过表达miR-543可通过靶向抑制TCF7L2表达而抑制BMSCs细胞成脂分化。

• 单位
  武汉市第三医院