摘要

目的 探讨靶向沉默Notch活化复合酶NACK对神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 通过脂质体介导siRNA转染SK-N-BE(2)细胞,qRT-PCR、Western blot方法检测转染后NACK基因的沉默效率;CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;qRT-PCR、Western blot方法检测靶向抑制NACK表达后Notch1信号传导通路下游靶基因Hes1、c-Myc和n-Myc的表达情况。结果 成功转染NACK siRNA的实验组细胞的NACK mRNA基因及其蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。CCK-8法检测到实验组细胞增殖率较阴性和空白对照组相比明显下降(P<0.01),流式细胞术检测到实验组细胞凋亡率较阴性和空白对照组明显增加(P<0.01)。Western blot、qRT-PCR方法检测到实验组Notch1信号通路下游相关靶基因Hes1、c-Myc和n-Myc的蛋白水平和mRNA表达水平较阴性对照组及空白对照组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 靶向沉默NACK基因可以抑制神经母细胞瘤SK-N-BE(2)细胞增殖,促进凋亡,有望成为神经母细胞瘤基因治疗的潜在靶点。

  • 单位
    青岛大学; 烟台毓璜顶医院; 滨州市人民医院