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摘要
PR10是病程相关蛋白(PRs)家族的重要成员，能增强植物抵御外界胁迫侵扰的能力。为进一步研究PR10蛋白的生物学功能，在转录组测序的基础上，利用RT-PCR技术获得一个粗枝云杉(Picea asperata Mast.)基因PaPR10-1，利用生物信息学方法对其核苷酸和氨基酸序列进行结构和功能分析，进一步构建PaPR10-1融合蛋白原核表达系统，获得高纯度PaPR10-1融合蛋白，并采用底物法体外分析其核糖核酸酶活性。结果显示：PaPR10-1基因ORF长486 bp，编码161个氨基酸。PaPR10-1蛋白无跨膜结构和信号肽，为胞内蛋白，含有“P-Loop”和Bet＿v1-like保守结构域。系统进化分析结果表明，PaPR10-1蛋白与海岸松(Pinus pinaster Aiton)PR10蛋白归为一个分支，亲缘关系较近。目的蛋白在30℃下以0.2 mmol/L的IPTG诱导1 h表达量最佳，且具有核糖核酸酶活性。
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