非洲猪瘟病毒CD2v基因实时荧光PCR检测方法的建立

作者：王彩霞; 吴绍强; 王勤; 陈冬杰; 张舟; 冯春燕^*; 林祥梅^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(09): 1083-1089.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0154

• 非洲猪瘟病毒
• 实时荧光PCR
• CD2v基因
• 检测

为建立一种准确、特异、高效、快速的非洲猪瘟病毒(ASFV)实时荧光PCR检测方法,本研究根据ASFV CD2v基因序列,设计了TaqMan荧光PCR引物及探针,通过优化退火温度、引物及探针的比例,建立了ASFV的TaqMan实时荧光PCR检测方法。结果表明,本研究所建立的荧光PCR方法具有良好的特异性和敏感性,以重组质粒为标准品建立的TaqMan荧光PCR方法的标准曲线具有良好的线性关系,相关系数为0.988,斜率为-3.025 4,最低检测限可达到10 copies/μL,且与伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等多种猪病病毒不存在交叉反应。该方法重复性良好,批内和批间变异系数均小于2%。综上,本研究建立的非洲猪瘟CD2v基因实时荧光定量PCR方法为ASFV的检测提供了一种新的敏感、特异的分子检测技术。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院