草莓果实酵母双杂交文库的构建及FaNAC56互作蛋白的筛选

作者：乔钰媛; 吴敏; 侯柄竹

来源：分子植物育种, 2022, 1-11.

• 草莓
• FaNAC56
• cDNA文库
• CaLB

NACs是植物特有的转录因子。前期研究发现，FaNAC56是调控草莓果实成熟的重要调控因子。为了探究FaNAC56参与调控的分子机理，本研究以八倍体‘红颜’品种草莓（Fragaria×ananassa Duch.）为材料，构建白果期果实的酵母双杂交cDNA文库，利用共转化方法从文库中筛选与FaNAC56互作的蛋白，并利用Y2H、BiFC和LCI方法对互作蛋白进行验证。结果表明，构建的酵母双杂交文库的库容为3.5×107 CFU，平均插入片段大于等于1 000 bp，阳性率为≥98%。从酵母双杂交文库中筛选到13个蛋白，其中经过酵母双杂系统点对点验证，发现FaNAC56不仅能自身形成二聚体，还能够与FBP1 （F-box protein）、CaLB （Calcium-dependent lipid-binding）和PCR2 （PLANT CADMIUM RESISTANCE 2-like）蛋白互作。选取同在植物生长发育过程中发挥重要作用的CaLB进行进一步互作验证，BiFC和LCI结果均说明CaLB和FaNAC56有强烈相互作用。本研究为进一步探究FaNAC56参与调控果实发育的分子机理提供依据。

• 单位
  中国科学院植物研究所; 中国科学院大学