DJ-1拮抗ROS介导Beclin-1上调在缺氧复氧HL-1心肌细胞中的作用

作者：晏浩; 李文林; 徐建军; 朱书强; 龙翔; 车建鹏

来源：基础医学与临床, 2013, 33(06): 763-768.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2013.06.037

• 缺血再灌注
• 自噬
• DJ-1
• 凋亡
• 氧自由基

目的探讨DJ-1拮抗氧化应激诱导过度自噬在缺血再灌注心肌损伤中的保护机制。方法以慢病毒为shRNA DJ-1载体感染心肌HL-1细胞系构建缺氧复氧损伤模型。Western blot检测shRNA DJ-1沉默效率和LC3、Beclin-1和DJ-1蛋白表达,流式细胞术AnnexinⅤ和PI染色分别检测凋亡和坏死,MDC和DCFH-DA染色分别检测细胞内自噬体和氧自由基(ROS)水平,激光共聚焦显微镜观察细胞内自噬体数量变化。结果 1)慢病毒为shRNADJ-1载体感染心肌HL-1细胞后DJ-1表达水平下调;2)缺氧复氧显著上调ROS,而shDJ-1加剧缺氧复氧ROS水平上调,NAC可以有效下调细胞内ROS水平;3)Western blot检测LC3、Beclin-1自噬标志蛋白和MDC染色细胞内自噬体结果均认为缺氧复氧促进自噬,而shDJ-1加剧缺氧复氧导致的自噬上调,NAC抑制自噬上调;4)流式细胞术检测显示shDJ-1增加缺氧复氧凋亡,NAC可以减少心肌细胞凋亡。结论 DJ-1拮抗ROS介导Beclin-1上调参与保护缺血再灌注心肌。

• 单位
  南昌大学医学院; 南昌大学第二附属医院