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摘要
目的 建立一种酶促重组酶扩增（ERA）和侧流层析技术（LF）相结合的沙门菌快速检测方法，为沙门菌现场检测提供技术支持。方法 根据沙门菌属高度保守的鞭毛基因fimY设计特异性ERA引物，采用毛细管电泳筛选合适的引物，再设计探针，对扩增温度和时间进行优化，建立ERA-LF检测体系对菌株DNA进行扩增，采用侧向流试纸条检测产物。采用鼠伤寒沙门菌标准菌株检验方法的灵敏度，采用10种其他肠道感染标准菌株检验特异度，采用实际分离到的沙门菌验证对实际样本检测能力。结果 经过毛细管电泳筛选获得沙门菌特异性引物，在扩增温度为37℃、反应时间为20 min的条件下，最低检测浓度为5 copies/μL。本方法对沙门菌核酸扩增结果为阳性，10株其他肠道感染菌核酸扩增结果均为阴性，特异度较好。对100株（包含10种血清型）沙门菌进行检测，结果均显示阳性。结论 本研究建立的ERA-LF方法可用于沙门菌的现场即时检测。
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单位内蒙古科技大学包头医学院; 中国疾病预防控制中心; 北京市朝阳区疾病预防控制中心
